03. Науково-дослідний інститут експериментальної та клінічної медицини ХНМУ

Permanent URI for this communityhttps://repo.knmu.edu.ua/handle/123456789/28170

Browse

Search Results

Now showing 1 - 10 of 26
  • Thumbnail Image
    Item
    Human HMGB1 does not induce eryptosis in vitro
    (2022) Tkachenko, Maryna; Onishchenko, Anatolii; Butov, Dmytro; Butova, Tetyana; Tkachenko, Anton
    Aim: To study the ability of human high mobility group box protein 1 (HMGB1) to induce eryptosis in vitro. Material and methods: Blood collected from six healthy volunteers was incubated with HMGB1 (0-0.2-1-5 ng per ml). Eryptosis of red blood cells was assessed by Annexin V staining and 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (H2DCFDA) staining by flow cytometry. The forward scatter (FSC) fluorescence was used to evaluate the morphology of red blood cells. Results: Exposure of erythrocytes to HMGB1 did not affect the morphology of erythrocytes, evidenced by no changes in the percentage of cells with small volume, i.e. shrunken cells, and erythrocytes with large volume, i.e. enlarged cells. HMGB1 had no impact on phosphatidylserine externalization, which is confirmed by the absence of statistically significant changes in the amount of phosphatidylserine-displaying cells and the mean fluorescence intensity (MFI) values of Annexin V-FITC in cells exposed to different concentrations of HMGB1. Furthermore, H2DCFDA staining revealed that the HMGB1 did not induce oxidative stress. Conclusion: HMGB1 does not promote eryptosis of human erythrocytes at concentrations of up to 5 ng/ml.
  • Thumbnail Image
    Item
    Semi-refined carrageenan induces eryptosis in a Ca2+-dependent manner
    (2022) Tkachenko, Anton; Prokopiuk, Volodymyr; Onishchenko, Anatolii
    Background: Semi-refined carrageenan (food additive E407a) is a widely used thickener, which has been reported to exert toxic and pro-inflammatory effects. In particular, there is accumulating evidence that it induces eryptosis, i.e. a programmed cell death of eryptocytes, via ROS-mediated pathways. However, the role of Ca2+-dependent mechanisms in E407a-induced eryptosis is not elucidated. Material and methods: Semi-refined carrageenan at concentrations of 0 mg/ml, 1 mg/ml, 5 mg/ml and 10 mg/ml was incubated with blood of intact female WAG rats (n=9) for 24 h in RPMI and fetal bovine serum. After 24 h, the samples were used to obtain erythrocyte suspensions. The obtained suspensions were stained with a Ca2+-sensitive FLUO4 AM probe (30 min, 2.5 µM). The fluorescence of FLUO4 in erythrocytes was detected by a BD FACSCanto II flow cytometer. Results: The intracellular Ca2+ levels are proportional to the fluorescence of FLUO4. The mean fluorescence intensities (MFI) were compared. Low levels (1 mg/ml) of E407a had no impact on Ca2+ concentrations in erythrocytes (p>0.05). On the contrary, high concentrations (5 mg/ml and 10 mg/ml) of this food additive promoted an increase in the intracellular Ca2+ levels. The MFI values were 2.3- and 2.5-fold higher, respectively (p<0.0001). In addition, the exposure to E407a at concentrations of 5 mg/ml and 10 mg/ml (p<0.0001) increased the percentage of cells with high FLUO4 fluorescence. Conclusion: Food additive E407a induces eryptosis in a Ca2+-dependent manner.
  • Thumbnail Image
    Item
    Current issues of resistant tuberculosis and smoking (review)
    (2022) Butova, Tetiana; Tkachenko, Anton; Butov, Dmytro
    Tuberculosis and smoking are among the most pressing issues in the modern health care system in the world. Tuberculosis patients who smoke are confirmed to have reduced the effectiveness of anti-tuberculosis therapy, unsatisfactory prognosis of a specific disease, higher risk of treatment failure and mortality from this disease. Diseases such as HIV and alcoholism increase ineffective treatment in tobacco smokers. In addition, smoking leads to increased virulence of the causative agent of tuberculosis - Mycobacterium tuberculosis.
  • Thumbnail Image
    Item
    Intake of semi-refined carrageenan causes low-grade colonic inflammation and alters expression of epithelial-mesenchymal transition markers
    (2022) Onishchenko, Anatolii; Gubina-Vakulyck, Galina; Knigavko, Oleksandr; Sharashydze, Ketino; Pionova, Olena; Butov, Dmytro; Polikarpova, Hanna; Tkachenko, Anton
    The aim of this research was to evaluate the effects of semi-refined carrageenan consumed orally on the amount of CD3 and CD68 positive cells residing in the colon and the expression of endothelial-mesenchymal transition (EMT) markers. Materials and methods. To assess colonic expression of CD3+, CD68+, fascin, vimentin and E-cadherin, sections obtained from 8 rats orally exposed to semi-refined carrageenan (E407a) at a dose of 140 mg / kg of weight during 14 consecutive days and 8 control animals were immunostained with the corresponding antibodies. Levels of expression were assessed quantitatively. Results. Oral exposure to semi-refined carrageenan resulted in an increase in CD3 and CD68 positive cells in the colonic lamina propria. Quantitative analysis of fascin, vimentin and E-cadherin immunostaining revealed changes in expression of these EMT markers both in the colonic stroma and epithelial cells. Vimentin and fascin were overexpressed in stromal and epithelial cells, while E-cadherin was upregulated in the stroma and downregulated in epithelia. Conclusions. Our observations suggest that oral intake of semi-refined carrageenan results in the development of low-grade colonic inflammation accompanied by infiltration with CD3 and CD68 positive cells and changes in the expression of EMT markers.
  • Thumbnail Image
    Item
    Cytotoxicity of Hybrid Noble Metal-Polymer Composites
    (2022-10-11) Tkachenko, Anton; Virych, Pavlo; Myasoedov, Valeriy; Prokopiuk, Volodymyr; Onishchenko, Anatolii; Butov, Dmytro; Kuziv, Yuliia; Yeshchenko, Oleg; Zhong, Sican; Nie, Guochao; Kutsevol, Nataliya
    The aim of the present research was to assess the cytotoxicity of gold and silver nanoparticles synthesized into dextran-graft-polyacrylamide (D-PAA) polymer nanocarrier, which were used as a basis for further preparation of multicomponent nanocomposites revealed high efficacy for antitumor therapy. The evaluation of the influence of Me-polymer systems on the viability and metabolic activity of fibroblasts and eryptosis elucidating the mechanisms of the proeryptotic effects has been done in the current research. The nanocomposites investigated in this study did not reduce the survival of fibroblasts even at the highest used concentration. Our findings suggest that hybrid Ag/D-PAA composite activated eryptosis via ROS- and Ca2+-mediated pathways at the low concentration, in contrast to other studied materials. Thus, the cytotoxicity of Ag/D-PAA composite against erythrocytes was more pronounced compared with D-PAA and hybrid Au/polymer composite. Eryptosis is a more sensitive tool for assessing the biocompatibility of nanomaterials compared with fibroblast viability assays.
  • Thumbnail Image
    Item
    Вплив харчової добавки Е407а на вміст маркерів запалення у сироватці крові щурів
    (2021-04) Ткаченко, Антон Сергійович; Горбач, Тетяна Вікторівна; Оніщенко, Анатолій Ігорович
    У науковій спільноті активно обговорюється необхідність регламентації вмісту харчової добавки Е407а (напівочищенний карагенан) в продуктах харчування. Дані добавки широко використовується для поліпшення текстури продуктів харчування. Однак, експериментальні дані вказують на прозапальні властивості Е407а. Метою роботи була оцінка інтенсивності Е407а-індукованого запалення шлунково-кишкового тракту шляхом дослідження вмісту циркулюючих маркерів запалення та ендогенної інтоксикації.
  • Thumbnail Image
    Item
    Оцінка короткострокової дії наночастинок GdYVO4:Eu3+ на інтенсивність процесів ериптозу
    (2021-04) Ткаченко, Антон Сергійович; Оніщенко, Анатолій Ігорович; Прокопюк, Володимир Юрійович
    Завдяки своїм унікальним властивостям наноматеріали розглядаються в якості перспективних терапевтичних засобів. Однак одним із факторів, які лімітують імплементацію наночастинок у клінічну практику, є їх відносна токсичність. Однією з перспективних моделей оцінки цитотоксичності ксенобіотиків, зокрема й наночастинок, є, дослідження інтенсивності процесів ериптозу, тобто запрограмованої загибелі еритроцитів. Метою дослідження було вивчення впливу наночастинок ортованадатів гадолінію-ітрію за умов короткострокової дії на інтенсивність процесів ериптозу.
  • Thumbnail Image
    Item
    Экспериментальная оценка эритротоксического действия различных доз пищевой добавки Е407а методом проточной цитометрии
    (2021-03) Ткаченко, Антон Сергеевич; Наконечная, Оксана Анатолиевна; Онищенко, Анатолий Игоревич; Прокопюк, Владимир Юрьевич
    В настоящее время в научной среде наблюдается активная дискуссия в отношении необходимости регуляции содержания пищевых добавок Е407 (очищенный каррагинан) и Е407а (полуочищенный каррагинан) в продуктах питания. Данные добавки широко используется из-за своих гидроколлоидных свойств в качестве загустителей. В то же время, экспериментальные и даже клинические данные указывают на токсичность каррагинанов. Целью работы было изучение эритротоксичности пищевой добавки Е407а при непосредственном воздействии в различных концентрациях.
  • Thumbnail Image
    Item
    Наночастицы GdYVO4:Eu3+ не стимулируют эриптоз в эксперименте in vitro
    (2021-03) Онищенко, Анатолий Игоревич; Прокопюк, Владимир Юрьевич; Клочков, В.К.; Ефимова, С.Л.; Кавок, Н.С.; Ткаченко, Антон Сергеевич
    Оценка интенсивности процессов эриптоза, т.е. запрограммированной гибели эритроцитов, активно применяется в токсикологии с целью определения цитотоксичности ксенобиотиков, в том числе и лекарственных препаратов. Существуют данные относительно прооксидантных свойств наночастиц GdYVO4:Eu3+, поэтому актуальным вопросом является изучение их влияния на процессы эриптоза при непосредственном воздействии. Целью исследования явилось изучение воздействия наночастиц GdYVO4:Eu3+ на интенсивность процесса эриптоза.
  • Thumbnail Image
    Item
    Влияние наночастиц ортованадата гадолиния на генерацию активных форм кислорода в эксперименте in vivo
    (2021-02-19) Ткаченко, Антон Сергеевич; Онищенко, Анатолий Игоревич; Клочков, В.К.; Ефимова, С.Л.; Кавок, Н.С.; Прокопюк, Владимир Юрьевич
    Примером перспективных с медицинской точки зрения наноматериалов являются наночастицы ортованадата гадолиния с примесью европия GdVO4:Eu3+, синтезированные в Институте сцинтилляционных материалов НАН Украины (г.Харьков, Украина). Вопросы цитотоксичности данных наночастиц остаются открытыми. Целью работы явилась экспериментальная оценка способности наночастиц GdVO4:Eu3+ индуцировать генерацию активных форм кислорода (АФК) в лейкоцитах при пероральном употреблении.